南京博研生物：小鼠促卵泡素（FSH）ELISA试剂盒工作原理

南京博研生物科技有限公司提供的小鼠促卵泡素（FSH）ELISA试剂盒的检测原理基于双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）技术。这种技术允许特异性地定量检测样本中的FSH浓度。以下是该试剂盒的工作原理：

固相抗体包被：

首先，特异性抗小鼠FSH的单克隆或多克隆抗体被包被（固定）在ELISA板的微孔中。这个抗体能够特异性识别FSH。

样本或标准品的加入：

然后，将含有未知浓度FSH的样本（如小鼠血清、血浆或细胞培养上清液）或一系列已知浓度的标准品加入到包被了抗体的微孔中。

孵化和捕获：

在恒温条件下孵化，样本或标准品中的FSH会与固相抗体特异性结合，形成抗体-抗原复合物。

洗涤：

孵化后，通过多次洗涤去除未结合的样本成分和其他可能的杂质。

酶标二抗体的加入：

加入第二种抗小鼠FSH的抗体，这次是与酶（如辣根过氧化物酶HRP）共价结合的。这种二抗体与固相抗体上的FSH结合，形成“夹心”结构。

再次孵化和洗涤：

再次恒温孵化使酶标二抗体与FSH充分结合，然后再次洗涤去除未结合的酶标二抗体。

底物的加入：

加入含有底物的溶液，该底物在酶（HRP）的催化下会发生颜色变化。

显色反应：

底物在酶的作用下发生化学反应，产生颜色变化（例如，TMB底物在HRP催化下由无色变为蓝色）。

终止反应：

加入酸性终止液（如硫酸）使颜色变化停止，并改变颜色（例如，将蓝色变为黄色）。

吸光度读数：

使用酶标仪在特定波长（通常为450 nm）下测量每个微孔的吸光度（OD值）。FSH的浓度与吸光度值成正比。

结果计算：

通过标准曲线（由已知浓度的标准品产生的吸光度值绘制）计算样本中FSH的浓度。

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